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如何进行细胞培养

04月07日 编辑 39baobao.com

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细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,通过细胞培养既可以获得大量细胞,又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等。

如何培养人EPC细胞

EPC是endothelial progenitor cells,的缩写,在医学上为内皮祖细胞,是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管细胞(angioblast)。是1997年,由Asahara等首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞,并将其命名为血管内皮祖细胞。

EPC起源:

目前普遍认为EPC为内皮细胞系与造血细胞系在胚胎发育期共同来源于中胚层一种成血管内皮细胞。

EPC的功能:

EPCs是一群具有游走特性,能自我更新、增殖分化为内皮细胞的多能干细胞,具有迟发性高增殖潜能及定向归巢特性。EPC细胞表面既存在造血干细胞表面标志,如CD34、CDl33,又存在内皮细胞表面标志VEG—FR-2,它可以摄取乙酰化低密度脂蛋白,具有yon Willebrand因子,在体外培养中具有特异的形态特征。它与血管新生、心血管组织工程内皮化等关系密切,在基础研究、肢体缺血性疾病及心血管疾病等领域有关EPC的研究非常活跃,从而为治疗缺血性疾病、血管组织工程及肿瘤治疗提供了新的思路和手段。

EPC应用前景:

内皮祖细胞取材方便,在血管再生和心血管疾病的细胞治疗和基因治疗中具有广阔的应用前景。例如,利用内皮祖细胞修复心肌梗死患者的心脏,治疗I临床肢体缺血,治疗冠状动脉疾病,改善血管移植物的通畅率,改善糖尿病患者的血管形成能力,定向抑制肿瘤血管生成,作为基因治疗导向载体和靶细胞,等等。应用内皮细胞治疗心血管疾病将是很有前途的新方法。

细胞是怎样生长的

发表于刚刚出版的《生物学》(Journal of Biology)的一项研究,挑战近代生物学中关于细胞生长的理论。研究人员表示,哺乳细胞并不会调控它们的大小,因而驳斥了科学家从70年代以来的假说。 研究人员Conlon 和Raff 做了一系列的试验,使用大鼠坐骨神经的Schwann细胞进行研究,建立哺乳细胞如何控制它们的大小并且决定于何时进行分裂。这种细胞决定大小、生长和分裂的过程,已经在酵母中普遍地研究了30年。当酵母和哺乳动物的细胞生长及分裂时,知道要维护恒定的细胞大小。 因此研究人员长久以来假设,酵母细胞可以确保分裂及生长时达到正确大小的机制,也适用于哺乳动物的细胞,但这项假说并未进行实验测试,直到这篇研究发表。 使用精确地测量方式,Conlon 和Raff 发现酵母和哺乳细胞生长上的重要区别。

酵母细胞成指数地增长,在固定的时期大小加倍,但哺乳细胞则是线性地生长,每天增加的大小是一致的;这意味着,哺乳细胞增长的比率是相同的,但是酵母细胞中,较大的细胞生长得会比小的更为快速。

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