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生物检测法包括哪些检测方面

02月17日 编辑 39baobao.com

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生物检测法包括:

(1)生物毒性试验法。小鼠生物法是AOAC推广的检测麻痹性贝类毒素的标准方法,是国际上都能接受的唯一的方法。该方法在检测样本总毒性方面相当成功,但是无法准确定性样本中单个毒素。此外,还有家蝇生物分析法、蝗虫生物分析法。上述3种生物分析技术原理相似。

(2)细胞毒性试验法。石房蛤毒素具有Na+通道阻滞剂的特性,可拮抗箭毒、藜芦碱的作用,以减少或“解救”细胞形态的改变及细胞裂解死亡,且该拮抗或“解救”作用与毒素的量呈对应关系。根据该对应关系可以计算出毒素的含量。早期建立的方法是用显微镜计数活细胞数以检测PSP毒素的量,但试验时间长,操作繁琐,所需细胞量大。 在该原理之上发展起来一种STX的快速诊断装置MIST,已成功用于酸性粗毒中PSP总毒性的测定及STX、neoSTX、GTX和dcSTX相关毒性的测定,该装置的灵敏度高,检测迅速且无需组织培养的设备及专业知识。

(3)免疫分析技术。随着抗STX抗体的获得,免疫分析技术如血球凝聚反应、放射免疫分析(RIA)和酶联免疫分析(ELISA)等逐渐发展起来,其中直接竞争ELISA法是最常用的一种方法,检测限可达3pg/ml,间接ELISA的检测限也可达到10pg/ml。 免疫方法灵敏度高,方便迅速,但抗体的获得是其关键,各毒素的交叉反应低,不能完全体现样品的毒性来源。

(4)受体分析法。即固相受体结合法(solid-phase receptor binding assay),主要是根据PSP毒素能与Na+通道蛋白质结合的特点,应用同位素标记以检测PSP类毒素的量,具有快速、可靠、准确的特点。 Llewellyn等以一种特异结合STX的类似转铁蛋白Saxiphilin代替Na+通道蛋白质,其对STX的鉴定具有专一性,从而与TTX的鉴定相区别。

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