[细胞分泌－－细胞生物学]细胞的分泌与内吞作用 将蛋白质运送给细胞质膜或细胞外是通过细胞的胞吐作用（exocytosis）， 也称细胞的分泌活动。与分泌过程相反的是细胞的内吞作用。 9.5.1 细胞分泌（cell secr...+阅读

制备（复制的~）

1.将冻存的菌种1:100接种于3ml的LB液体培养基中，37℃摇床过夜震荡培养。

2.取1ml活化菌种接种于100mlLB培养基中，37℃摇床培养1.5-2h。

3.将菌种在冰上放置10min。4℃、4000rpm下离心10min收集菌体。

4.弃上清，用事先冰浴的0.1mol/Lcacl2重新悬浮细胞，冰浴30min。

5.收集菌体，条件同上。

6.弃上清，在冰浴条件下加入0.1mol/Lcacl2溶液。

7.分装保存（40%甘油与感受态细胞1:1混合，使甘油的终浓度为20%）。

转化

1 连接产物加入感受态中

2 冰上放置30分钟

3 42° 90秒

4 冰上2-5分钟

5 涂板~

细胞转染（这里说的是脂质体转染，以六孔板为例，如果是电转或者病毒侵染的话再问我吧）

对于每一个孔

1 一管200ul OPTI+5ul lipofectin 静置5分钟

2 一管200ul OPTI+4ug 质粒

3 两管混合 静置20分钟

4 加入孔板中

5 4-6小时后换液

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