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首先载体可自我复制或整合到受体的染色体上，存在多个限制酶切点。

目的基因正确插入的位置为启动子与终止子之间，所以没有插对或者没有插入的载体，在启动子带动后就遇到终止子停止了，所以使标记基因不能正常表达或不表达。

而目的基因有可能插入标记基因上使标记基因不能正确表达，是在筛选的时候表达，所以要用选择性培养基筛选。

并且在导入受体细胞之后标记基因就不再表达了。

高中生物也没有详细说明是否整体整合到受体染色体上。

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