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首先打开软件

左上角来操作

file——new——dna sequence

这一项可以把你复制的序列粘贴进去

当然，你也可以选择另一个

file——open——dna sequence

去open一个新的文件。在接下来的界面里

复制你的序列，于是就将序列导入了点击search

进入下图界面开始设计引物

在此图中有6个部分，红色数字标示

1区，包括三部分，可以选择设计pcr引物，测序引物和杂交探针

2区，搜寻模式，包括正链，反链等，我们一般选最后一项pairs，出来一组引物

3区，引物的范围，上游引物所在范围，下游引物所在范围

4区，pcr 长度，根据需要设置

5区，引物长度，这个是调整的重点，前面是长度，后面是±

6区，选择模式，一般选auto，也可以手动下面是一个设计

我选择了

正链位于1-400内

负链位于500-910内

产物长度100-600

引物长度为20±1bp

输入后，出现下图界面

共有1000多条引物

点击ok

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