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一、分析方法的设定依据：

⑴重视并做好文献总结、整理工作；

⑵充分了解待测药物的特性及体内存在状况；

⑶明确测定的目的要求；

⑷实验室条件。

二、方法建立的一般步骤：

⑴以纯品进行测定：以一定量纯品按拟定方法进行测定。求得浓度与测定响应值之间（如吸收度、色谱峰高或面积等）的关系，浓度线性范围，最适测定浓度，检测灵敏度，测定的最适条件（pH、温度、反应时间）等等。

⑵以经过纯化处理过的空白样品进行测定；

⑶空白样品添加标准后的测定：血样等样品中添加一定量标准品后进行测定，求得样品回收率数据，检验生物样品对测定有无干扰等。

⑷体内实际样品测定：有时用体外建立的方法去测定体内取得的实样时，会得出错误的结论。故要强调对药物体内过程有一定程度的了解。有时也采用专属性强、已证明适用于体内实样测定的步骤和方法作为对照测定，并以此来检验所建立的方法的实际可行性。

三、方法的评价：

⑴准确度（Accuracy）：测定结果与真值的符合程度。常用回收率（Recovery）数值间接反映测定的准确程度；也可通过与其他已建立的方法进行比较的办法（参比方法）来加以反映。回收率100%当然好，但很难达到。重要的是每次测定要保持稳定。

⑵精密度（Precision）：测定结果与平均值的偏离程度。测定间偏差越小，对测定的要求也越高（花费大）；浓度与RSD值间存在反比关系，RSD在10%以内的方法可认为是可接受的。

⑶灵敏度（Sensitivity）：“一种方法可以检测出有关化合物的最小量”。常用最低检测限（Limit of detection,LOD）或最低检测量（Limit of quantification;LOQ）来表示。LOD范围在ng(10-9g)~10-18g。

⑷专属性或选择性（Specificity or Selectivity）：是指测定的信号（响应）是属于被测药物所特有的。若有干扰就需改进测定方法或改用具有分离能力（如色谱法的专属性较吸收光度法为高）的方法或专属性较强的方法进行。

⑸不同方法测得结果的相关程度（Degree of correlation）的比较：用一有相当专属性和可*性的方法与新建方法同量测定，以相关系数γ（Correlation coefficient）表示相关程度。γ一般要求在0.95以上。

此外，还应从方法的可*性、每个样品测定耗时多少、操作的难易及技术要求及仪器、设备要求、费用多少等等方面加以考虑。

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