[大班健康活动研讨课的思考——飞飞城]今天上午,听了健康组的两堂行为跟进式研讨课。说实话,夏日炎炎,户外上健康课老师非常之辛苦,特别是担任健康教研组长的欢欣,身先士卒的参与到研讨课中,她和酸酸水果共同带来了非常...+阅读
应该说必修一《细胞增殖》是很难上的一节课,最近听了一位年轻老师的课——细胞增殖,教学目标达成,教学设计和过程科学合理,即导入新课→细胞周期概念→间期特点→分裂期特点→染色体和DNA的变化规律。应该说这样的教学设计符合学生的认知规律,但总觉得缺少点什么,也就是从学生的角度来说,真正让学生从微观上去理解和掌握细胞增殖的内容还是有点困难的。思考再三觉得还应该把握以下几方面: 首先,可以让学生设想细胞数目增加需要那些方面准备?过程会怎么样?这实际上是学生主体性的体现,有利于学生总体把握细胞增殖的变化规律。 然后,要让学生明白细胞内有好多变化,但我们的学习集中在染色体的变化规律来教学,重点一定要突出染色体这样的变化是为了遗传性状的稳定。
复制、螺旋化、移到赤道面、着丝粒分裂、纺锤丝牵拉都是为了染色体结构和数目的稳定,这种动态变化完全可以设想出来,不需要去死记硬背。 最后,由于概念繁杂,一定要对概念进行辨析:染色体和染色质;纺锤体和纺锤丝;赤道面和细胞板。...
细胞培养技术的增殖
培养细胞的生存环境是培养瓶、器皿或其他容器,生存空间及营养是有限的。当细胞增殖到一定密度后,分离出一部分细胞和更新营养液,使细胞更好地生存,这一过程称之为“传代”(passage或subculture)。值得注意的是:每次传代细胞在生长和增殖方面受到一定的影响。 指细胞在培养过程中持续增殖和生长的时间。一般根据细胞种类、性状和原供体的年龄的情况而定。如:二倍体成纤维细胞,在不冻存和反复传代条件下可传30~50代,相当于150~300个细胞增殖周期,能维持一年左右的生命,细胞便开始凋亡(apoptosis)。 细胞在生存过程中经历以下三个阶段1.原代培养期(primary culture) 组织到第一次传代时间大约为1~4周 特点:细胞移动活跃,但分裂不旺盛,多呈二倍体核型。原代与体内原组织形态结构和功能活动基本相似。各细胞的遗传性状互不相关,细胞相互依存性强,如果把这种稀释分散成单细胞,在软琼脂培养基中进行培养,细胞克隆的形成率(cloning efficiency)下降,表明细胞独立生存性差。2.传代期(passage) 初代培养细胞一经传代便称之为细胞系(cell line) 特点:细胞增殖旺盛,并维持二倍体核型,也叫二倍体细胞系(diploid cell line)为了保存二倍体细胞性质,细胞应在初代或传代早期冻存为好。一般细胞在10代以内冻存。冻存配方:向培养液加入保护剂二甲基亚砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。存于在液氮中温度可达到-196℃,可长期储存。如解冻后细胞复苏,仍能继续增殖生长,细胞性状不受影响,成为保存细胞最主要的手段。3.衰退期 特点:细胞仍生存 增殖减慢 不增殖 轮廓增强 衰退凋亡 注意:细胞在三期中的任何一期
(一般发生在传代后期或衰退期)在某些因素影响下,如血清质量不佳、病毒污染、温度和pH不稳等,细胞可能发生自发转化(spontaneous transformation); 细胞可能获得永生性(immortality) 或称为恶性性(malignancy)。细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体称为连续细胞系(continuous cell line)。而细胞获得不死性后,细胞核型大多变成异倍体(heteroploid)接触抑制消失。 “ 一代”指细胞接种到分离再培养的所用的时间。与细胞倍增一代不是一个含义。在细胞一代中,细胞能倍增3~6次,经历三个阶段:1. 潜伏期(latent phase) :接种 经过 悬浮期(细胞质回缩,胞体呈圆球形) 贴壁。初代培养细胞 经过 10~24小时或更多时间。连续细胞系和癌细胞系 经过 10~30分钟 贴附。贴附现象是一个非常复杂和受多种因素的影响。影响细胞贴附:底物表面不干净,影响细胞贴附。利于细胞贴附:底物表面带有阳性物质与特殊物质:纤粘连蛋白(fibronectin FN)、 细胞表面蛋白(cell surface proteinCSP) 这些物质有的存在与细胞表面,有的来自血清。潜伏期特点:长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。
(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相,细胞有运动活动。
(2)初代培养 细胞潜伏期约为24~96小时或更长,连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6~24小时。
(3)细胞接种密度大潜伏期短。
(4)细胞出现分裂相增多时,标志细胞进入指数增生期。2.指数增生期(logarithmic growth phase):特点:细胞增殖最旺盛阶段,分裂相增多。细胞分裂指数(mitotie index MI) :表示每1000个细胞中的分裂相数。条件:分裂相数与细胞种类、培养成分、pH培养箱温度有关。细胞分裂指数:初代细胞:在0.1%~0.5%之间% ,连续分裂细胞和肿瘤细胞:3 ~5%。指数增生期是作为细胞一代活力最好的时期,是进行实验最好和最主要的阶段。指数增生期持续3~5天,细胞数量增多后生长空间变小,细胞相互接触可连接成片。正常细胞:细胞相互接触能抑制细胞运动,这种现象称为接触抑制(contact inhibition)。肿瘤细胞:没有这种现象,可作为区别正常与肿瘤细胞的标志之一。当肿瘤细胞达到一定密度后向三维空间发展,使细胞发生堆积(piled up)。由于细胞不断增殖分裂,细胞数量持续增多,培养液的营养成分减少,代谢产物增多,细胞受营养的枯竭和代谢物的影响,则发生密度抑制(Density inhibition),导致细胞分裂停止。3.停滞期(stagnate phase) 细胞量和密度达到饱和,细胞停滞增殖。表明细胞进入到停滞期,细胞数量持平,也称为平顶期(plateau)。特点:细胞不增殖,有代谢活动。培养液中的营养已逐渐耗尽,代谢产物积累增多,pH降低,此时需要传代,否则细胞将会中毒,发生形态改变,细胞会从底物脱落死亡。注意:传代过晚将影响下一代细胞的生长,至少要再传 1~2代 ,通过换液淘汰死细胞和受损较轻的细胞。待细胞全部恢复后再用。在这一点上要特别注意。
高中生物细胞增殖部分怎么学
细胞增殖的主要形式是有丝分裂,那就以它为例,以下是关键内容
一、定义:
有丝分裂是指细胞核中的染色体发生复制,进而生成两个细胞核,
最后分裂成两个细胞的过程 【分裂前后DNA,染色体数目都不变】
二、阶段:
包括:1 分裂间期 【长】 2 分裂期(前期,中期,后期,末期)【短】
三,特征:
间期:DNA的复制、蛋白质的合成;
【间期染色体不变,DNA加倍】
前期:仁膜消失现两体;
(核仁核膜消失,出现染色体纺锤体)
中期:赤道板上排整齐 形态数目最清晰 ; 【选择中期观察】
后期:均分牵拉到两级; 【后期染色体数目加倍】
末期:与前期相反。
(仁膜出现两体消失)
【结束,染色体DNA恢复】
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