在细胞培养时，细胞的呼吸作用会产生很多CO2，和水结合会使细胞的生长环境PH下降，（酸化），这样不利于细胞的培养，为了保证细胞的培养环境在一个合理的酸碱平衡环境，就需要在培养液中加入缓冲液，中和掉部分的CO2，来保证培养的PH值平衡。

以下信息来源于，百科：

1、PBS(Phosphate-Buffered saline)磷酸盐缓冲液

甲液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、磷酸氢二钠（无水）28.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

乙液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、磷酸二氢钠（无水）2.4g、氯化钠8.77g加去离子水或双蒸水至1000mL

甲、乙液于4℃保存，使用时按表3-2所示比例，配制成所需pH浓度，高压灭菌后室温保存。

用途：缓冲液有助于保持恒定的pH值。解决方案的渗透压和离子浓度通常与人体pH相近（等渗）。

2、HEPES液

生物缓冲液，化学性质稳定，在PH7.2~7.6范围内，比NaHCO3缓冲液的缓冲能力更强。

HEPES

英文全称：4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid; N-2-Hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonic acid; 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazine]ethanesulfonic acid

中文全称：4-羟乙基哌嗪乙磺酸； N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸

分子式：C8H18N2O4S

分子量：238.31

用途：对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L，一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。

细胞培养常用10mmol/L。

10mmol/L HEPES缓冲液配制方法如下：准确称取HEPES 2.383g，加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌，分装后4℃保存。

3、NaHCO3缓冲液

常规缓冲体系的一部分，但是不稳定，易受空气中CO2的含量而改变PH值，影响缓冲效果。

一般使用较多的是磷酸盐缓冲液和NaHCO3缓冲液，因为它们比较容易配置，而且成本比较低。