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细胞培养首先分为原代培养和传代培养.

原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞，然后继续进行传代、冻存；

传代培养首先：

细胞复苏：

1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度，取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.

2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养瓶内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养，24h后换液；也可复苏当时离心（1000rpm 5min左右）后，完全培养基重悬培养，适时换液.

细胞传代：

1.贴壁细胞：

对于贴壁细胞应先吸（倒）尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱.PBS清洗2-3次，去除血清和死细胞，50ml培养瓶加入消化液约0.6ml，按此比例进行消化，（根据配制强度经验），晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后收集离心（1000rpm 5min左右），新鲜培养基重悬沉淀，加入完全培养基后继续培养或实验.

2.悬浮细胞：

一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度或需更换新培养基，可先离心（1000rpm,5min左右）后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.

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