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蒙药地锦草总黄酮提取工艺研究

11月06日 编辑 39baobao.com

蒙药地锦草总黄酮提取工艺研究 地锦草为大戟科植物地锦Euphorbiae humifusae willd.的干燥全草。具有止血、燥湿 "协日乌素"、愈伤、清脑、清脉热的功能。用于便血、创伤出血、衄血、吐血、肺脓疡、咯脓血痰、中风等。是蒙医常用药之一,如意至宝丸(额尔郭乌日勒)等方剂的主要药。地锦草主要含槲皮素甙及素、山奈素甙及素、地锦草素等黄酮类化合物。其煎剂、醇提液及地锦草素均有抗菌、止血等作用。我们曾对地锦草水提取液、乙醇提取液及总黄酮液抗自由基作用进行研究,结果证明地锦草有很强的清除和抑制自由基的作用。为进一步研究其有效成分,探索地锦草总黄酮提取最适条件,为提取工艺提供信息,以总黄酮含量为考察指标,采用正交实验等方法对地锦草总黄酮提取工艺进行了系统研究。

1 材料与仪器

药材由本院附属医院蒙药制剂室提供,经我院蒙药系鉴定教研室鉴定。均为《中国药典》1995版本品种Euphorbiae humifusae willd.的干燥全草。芦丁对照品由中国药品生物制品检验所提供,批号为080-9303,其它化学试剂均为AR级,实验用水为亚沸提纯水。

日立557双波长双光束分光光度计,754分光光度计(上海三分厂),FA160电子天平(上海天平仪器厂),PHS-WI型智能酸度计(杭州万达仪表厂)。

2 实验方法

2.1 吸收波长及稳定性考察:精密量取芦丁对照品液和样品液各5.0ml,分别置 25ml容量瓶中,加水至6ml,加5%NaNO2液1.0ml,放置6min,加10%Al(NO3)3试液1.0m l,放置6min,加10%NaOH试液10ml,加水至刻度,摇匀,放置15min,以相应试剂作空白,于557双光束/双波长分光光度计上进行全波长扫描,吸收波长为λmax500nm,同时,在 500nm波长处进行时间扫描,结果显示150min内基本稳定。

2.1.2 标准曲线的制备:精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品10.0mg,加甲醇溶解,转入50ml容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得对照品液(0.2mg/ml)。精密吸取该液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml,分别置25ml容量瓶中,加水至6ml,加5%NaNO2试液1.0ml,放置6min,加10%Al(NO3)3试液1.0ml,放置6min,加1 0%NaOH试液10ml,加水至刻度,摇匀,放置15min以相应试剂作空白,于500nm处测定吸光度。以浓度(C)与吸光度(A)进行直线回归,得回归方程为Y=0.0209+0.3467X,γ=0.9 997。在0.20~1.20mg范围内呈线性关系。

2.1.3 加样回收率测定:称取5.0g地锦草粗粉3份,精密称定,分别精密加入芦丁对照品,按样品制备法制备,并照标准曲线制备方法测定,计算其回收率。

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