[1唾液真菌培养1菌落数大于200 2真菌培养2白色念珠菌]白色念珠菌 本菌细胞呈卵圆形,很象酵母菌,比葡萄球菌大5~6倍,革兰氏染色阳性,但着色不均匀。在病灶材料中常见菌细胞出芽生成假菌丝,假菌丝长短不一,并不分枝,假菌丝收缩断裂又成为...+阅读
1. 将质粒转入DH5α的感受态态细菌中,涂布于含有氨苄抗性的固体培养板上,过夜培养。2. 挑选单克隆,转接3-5ml含氨苄抗性的液体培养基,37度振荡培养10-12h。3. 提取质粒(步骤省略),并将质粒进行进行琼脂糖凝胶电泳,一般可以观察到2-3条带,选择其中最下面一条带(超螺旋形式)大小约为2000左右的克隆。4. 以上述挑选的克隆质粒为模版,以M13为引物,进行PCR检测(步骤省略,退火温度为55度),注意设置阴性和阳性对照。5. PCR产物,进行琼脂糖凝胶电泳,注意选择合适的DNA分子量Marker,比如DL2000。6. 扩展产物为750bp左右条带的即为正确的克隆。