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如何建立HPLC法测定有关物质的方法

02月12日 编辑 39baobao.com

[初中化学各物质颜色性质特性总结]⑴ 固体颜色:Fe、C、CuO、MnO2、Fe3O4(黑色);Cu、Fe2O3(红色);Cu2(OH)2CO3(绿色);CuSO4·5H2O(蓝色)。 ⑵ 溶液颜色:CuCl2、CuSO4(蓝色);FeCl2、FeSO4(浅绿色);FeCl3、Fe2(SO4)3(黄色)。 ⑶ 火焰...+阅读

一、开始之前必须明白:

1、有关物质来源的两种途径:

1)合成过程中的中间体和副产物;

2)储存过程中产生的降解产物;

2、分析你的样品结构,熟悉样品的基本性质;

3、样品中可能含有的中间体;

4、样品的基本稳定性和可能产生的降解产物;

二、准备工作

1、查阅文献,看看是否同行已经做过类似的工作,有的话就简单了,直接奔主题了。

2、没有文献(苦!),那就很是麻烦了。

1)分析结构,看看有无紫外吸收,有就比较简单,选用紫外检测器就行了,没有的话那就麻烦,可以选用蒸发光散射检测器等;

2)分析结构,看看选用何种色谱方式进行分离(正相或者反相色谱);

3)分析结构,看看流动相该如何选择,要不要选用一些离子对试剂。

4)分析结构。。。。。。

5)与同类产品进行比较;

三、开工(以紫外检测为例)

1、流动相的选择(采用粗品进行选择)

1)、有文献,按文献进行优化。不过我得提醒一下,文献的方法参考是可以的,要想完全按照他的条件做出来是很难的。

2)、没有文献。。。。。。

a、紫外扫描一下,看看哪里有最大吸收。将能得到的中间体、副产物、分解产物、样品配成相同浓度,在紫外扫描分光光度计上扫描一下,选择所有物质具有相同的最大吸收处的波长作为测定波长。要是有pda检测器就不需要这一步了。

b、还是得找一些资料,看看类似的样品的流动相,以它为起始流动相进行选择,如果没有,那就找专业书吧,看看它是怎么教你选择流动相的。

2、最低检测限

3、系统适应性试验

重复进样5次,记录色谱图,给出系统评价报告

4、考察中间体及副产物和样品的分离度。同时定出中间体在色谱图中的出峰位置,为定质量标准提供依据。

5、考察降解产物和样品的分离情况。

这个一般是通过破坏性试验来考察。常用的一般是高温、强光、氧化、强酸、强碱五个因素进行考察,通过考察,应该可以知道色谱图中那些峰是由于什么因素产生,这个也可为定质量标准提供依据。

6、根据上面的试验,应该可以知道样品的一些大概情况了,样品中有哪些杂质应该比较明确了。现在对三批样品进行测定,通过归一化来观察,应该可以知道杂质的大概情况,根据这个可以定出相应采用自身对照法测定的杂质限量。一般情况下还应定出最大的单一杂质限量。如果样品中的杂质可以很好得到纯品,那么你就可以采用外标法来准确定量。

7、杂质的限量必须根据你的样品本身性质来定。

以下为关联文档:

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